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睪酮檢測試劑盒

睪酮檢測試劑盒

簡要描述•₪✘✘:

本試劑盒用於測定人血清✘↟•·、血漿及相關液體樣本中睪酮(T)含量││。

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睪酮檢測試劑盒
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用││。
檢測範圍•₪✘✘:   96T 
0.4nmol/L   - 12nmol/L   
使用目的•₪✘✘:
本試劑盒用於測定人血清✘↟•·、血漿及相關液體樣本中睪酮(T)含量││。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人睪酮(T)水平││。用純化的人睪酮(T)抗體包被微
孔板·✘,製成固相抗體·✘,往包被單抗的微孔中依次加入睪酮(T)·✘,再與HRP 標記的睪酮(T)抗體
結合·✘,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物·✘,經過徹底洗滌後加底物TMB顯色││。TMB在HRP
酶的催化下轉化成藍色·✘,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色││。顏色的深淺和樣品中的睪酮(T)
呈正相關││。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD值)·✘,透過標準曲線計算樣品中人睪
酮(T)濃度││。  
試劑盒組成  
1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標試劑  6ml×1 瓶  8  標準品(24nmol/L )  0.5ml×1 瓶
3  酶標包被板  12孔×8 條  9  標準品稀釋液  1.5 ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份
5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11   封板膜  2 張    
6  顯色劑 B 液  6ml×1/ 瓶  12  密封袋  1 個
標本要求  
1.標本採集後儘早進行提取·✘,提取按相關文獻進行·✘,提取後應儘快進行實驗││。若不能
馬上進行試驗·✘,可將標本放於-20℃儲存·✘,但應避免反覆凍融
2.不能檢測含 NaN3的樣品·✘,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性││。
操作步驟
1.   標準品的稀釋•₪✘✘:本試劑盒提供原倍標準品一支·✘,使用者可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋││。
12nmol/L   5 號標準品  150µl 的原倍標準品加入 15 0µl 標準品稀釋液
6nmol/L  4 號標準品  150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3nmol/L  3 號標準品  150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
1.5 nmol/L   2 號標準品  150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
0.7 5 nmol/L  1 號標準品  150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 
 2.   加樣•₪✘✘:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑·✘,其餘各步操作相同)✘↟•·、標準孔✘↟•·、
待測樣品孔││。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl·✘,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl·✘,
然後再加待測樣品 10 µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)││。加樣將樣品加於酶標板孔底部·✘,盡
量不觸及孔壁·✘,輕輕晃動混勻││。
3.   溫育•₪✘✘:用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鐘││。      
4.   配液•₪✘✘:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用
5.   洗滌•₪✘✘:小心揭掉封板膜·✘,棄去液體·✘,甩幹·✘,每孔加滿洗滌液·✘,靜置30秒後棄去·✘,如此
重複5 次·✘,拍幹││。
6.   加酶•₪✘✘:每孔加入酶標試劑 50µl·✘,空白孔除外││。  
7.   溫育•₪✘✘:操作同 3││。
8.   洗滌•₪✘✘:操作同 5││。
9.   顯色•₪✘✘:每孔先加入顯色劑 A50µl·✘,再加入顯色劑 B50µl·✘,輕輕震盪混勻·✘,37℃避光顯色
15分鐘.
10.  終止•₪✘✘:每孔加終止液50µl·✘,終止反應(此時藍色立轉黃色)││。
11.  測定•₪✘✘:以空白空調零·✘,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)││。  測定應在加終止
液後15 分鐘以內進行││。
睪酮檢測試劑盒
操作程式總結•₪✘✘:
計算
    以標準物的濃度為橫座標·✘,OD 值為縱座標·✘,在座標紙上繪出標準曲線·✘,根據樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD值計算出標
準曲線的直線迴歸方程式·✘,將樣品的 OD值代入方程式·✘,計算出樣品濃度·✘,再乘以稀釋倍數·✘,
即為樣品的實際濃度││。  
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘後方可使用·✘,酶標包被板開封后如未
用完·✘,板條應裝入密封袋中儲存││。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出·✘,稀釋時可在水浴中加溫助溶·✘,洗滌時不影響結果││。
3.各步加樣均應使用加樣器·✘,並經常校對其準確性·✘,以避免試驗誤差││。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內·✘,如標本數量多·✘,推薦使用排槍加樣││。
4. 請每次測定的同時做標準曲線·✘,做復孔││。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值
大於標準品孔*孔的 OD值)·✘,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)後再測定·✘,計
算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)││。
5. 封板膜只限一次性使用·✘,以避免交叉汙染││。
6.底物請避光儲存││。
7.嚴格按照說明書的操作進行·✘,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品·✘,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理││。
9.本試劑不同批號組分不得混用││。
10.  如與英文說明書有異·✘,以英文說明書為準││。
儲存條件及有效期
1.試劑盒儲存•₪✘✘:;2-8℃││。
2.有效期•₪✘✘:6 個月 
    

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