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人腫瘤壞死因子βELISA試劑盒 人TNF-β試劑盒7折*

人腫瘤壞死因子βELISA試劑盒 人TNF-β試劑盒7折*

簡要描述·•│▩:

人腫瘤壞死因子βELISA試劑盒 人TNF-β試劑盒由上海信帆生物提供◕╃◕。人TNF-β試劑盒靈敏度高•₪✘·,酶聯免疫技術服務•₪✘·,提供專業代測服務•₪✘·,享受零運費運輸•₪✘·,售後完善◕╃◕。ELISA試劑盒,品質保證!售前售中售後全程提供技術指導,有質量問題免費包退包換!瞭解產品詳情•₪✘·,諮詢◕╃◕。人腫瘤壞死因子βELISA試劑盒 人TNF-β試劑盒7折*

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所有產品僅供科研使用•₪✘·,不能用於食用和醫療等

產品中文·•│▩:人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
產品英文·•│▩:Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA kit 
貨號·•│▩:XF00121B
規格·•│▩:48T/96T
保質期·•│▩:6個月
儲存條件·•│▩:2到8度
上海信帆銷售ELISA試劑盒•₪✘·,全程提供技術指導•₪✘·,提供售後服務◕╃◕。
有質量問題•₪✘·,免費包退換•₪✘·,免除您的實驗後顧之憂◕╃◕。
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ELISA技術原理·•│▩:以免疫學反應為基礎•₪✘·,將抗原··✘↟₪、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來.
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記◕╃◕。
2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性◕╃◕。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性•₪✘·,又保留酶的活性◕╃◕。
4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應◕╃◕。再加入酶標記 的抗原或抗體•₪✘·,也透過反應而結合在固相載體上◕╃◕。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例◕╃◕。
6. 加入酶反應的底物後•₪✘·,底物被酶催化成為有色產物•₪✘·,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關•₪✘·,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析◕╃◕。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平)•₪✘·,並且重複性好◕╃◕。
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樣本處理及要求·•│▩:
1. 血清·•│▩:室溫血液自然凝固10-20分鐘•₪✘·,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清•₪✘·,儲存過程中如出現沉澱•₪✘·,應再次離心◕╃◕。
2. 血漿·•│▩:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑•₪✘·,混合10-20分鐘後•₪✘·,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清•₪✘·,儲存過程中如有沉澱形成•₪✘·,應該再次離心◕╃◕。
3. 尿液·•│▩:用無菌管收集•₪✘·,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清•₪✘·,儲存過程中如有沉澱形成•₪✘·,應再次離心◕╃◕。胸腹水··✘↟₪、腦脊液參照實行◕╃◕。
4. 細胞培養上清·•│▩:檢測分泌性的成份時•₪✘·,用無菌管收集◕╃◕。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清◕╃◕。檢測細胞內的成份時•₪✘·,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液•₪✘·,細胞濃度達到100萬/ml左右◕╃◕。透過反覆凍融•₪✘·,以使細胞破壞並放出細胞內成份◕╃◕。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清◕╃◕。儲存過程中如有沉澱形成•₪✘·,應再次離心◕╃◕。
5. 組織標本·•│▩:切割標本後•₪✘·,稱取重量◕╃◕。加入一定量的PBS•₪✘·,PH7.4◕╃◕。用液氮迅速冷凍儲存備用◕╃◕。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度◕╃◕。加入一定量的PBS(PH7.4)•₪✘·,用手工或勻漿器將標本勻漿充分◕╃◕。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)◕╃◕。仔細收集上清◕╃◕。分裝後一份待檢測•₪✘·,其餘冷凍備用◕╃◕。
6. 標本採集後儘早進行提取•₪✘·,提取按相關文獻進行•₪✘·,提取後應儘快進行實驗◕╃◕。若不能馬上進行試驗•₪✘·,可將標本放於-20℃儲存•₪✘·,但應避免反覆凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品•₪✘·,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性◕╃◕。
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操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣·•│▩:在酶標包被板上設標準品孔10孔•₪✘·,在*··✘↟₪、第二孔中分別加標準品100μl•₪✘·,然後在*··✘↟₪、第二孔中加標準品稀釋液50μl•₪✘·,混勻;然後從*孔··✘↟₪、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔•₪✘·,再在第三··✘↟₪、第四孔分別加標準品稀釋液50μl•₪✘·,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉•₪✘·,再各取50μl分別加到第五··✘↟₪、第六孔中•₪✘·,再在第五··✘↟₪、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul•₪✘·,混勻;混勻後從第五··✘↟₪、第六孔中各取50μl分別加到第七··✘↟₪、第八孔中•₪✘·,再在第七··✘↟₪、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl•₪✘·,混勻後從第七··✘↟₪、第八孔中分別取50μl加到第九··✘↟₪、第十孔中•₪✘·,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl•₪✘·,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉◕╃◕。(稀釋後各孔加樣量都為50μl•₪✘·,濃度分別為30ng/L•₪✘·,20ng/L •₪✘·,10ng/L•₪✘·,5ng/L•₪✘·, 2.5ng/L)◕╃◕。
2. 加樣·•│▩:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑•₪✘·,其餘各步操作相同)··✘↟₪、待測樣品孔◕╃◕。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl•₪✘·,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)◕╃◕。加樣將樣品加於酶標板孔底部•₪✘·,儘量不觸及孔壁•₪✘·,輕輕晃動混勻◕╃◕。
3. 溫育·•│▩:用封板膜封板後置37℃溫育30分鐘◕╃◕。
4. 配液·•│▩:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用◕╃◕。
5. 洗滌·•│▩:小心揭掉封板膜•₪✘·,棄去液體•₪✘·,甩幹•₪✘·,每孔加滿洗滌液•₪✘·,靜置30秒後棄去•₪✘·,如此重複5次•₪✘·,拍幹◕╃◕。
6. 加酶·•│▩:每孔加入酶標試劑50μl•₪✘·,空白孔除外◕╃◕。
7. 溫育·•│▩:操作同3◕╃◕。
8. 洗滌·•│▩:操作同5◕╃◕。
9. 顯色·•│▩:每孔先加入顯色劑A50μl•₪✘·,再加入顯色劑B50μl•₪✘·,輕輕震盪混勻•₪✘·,37℃避光顯色15分鐘. 
10. 終止·•│▩:每孔加終止液50μl•₪✘·,終止反應(此時藍色立轉黃色)◕╃◕。
11. 測定·•│▩:以空白空調零•₪✘·,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)◕╃◕。 測定應在加終止液後15分鐘以內進行◕╃◕。
注意事項·•│▩:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用•₪✘·,酶標包被板開封后如未用完•₪✘·,板條應裝入密封袋中儲存◕╃◕。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出•₪✘·,稀釋時可在水浴中加溫助溶•₪✘·,洗滌時不影響結果◕╃◕。
3. 各步加樣均應使用加樣器•₪✘·,並經常校對其準確性•₪✘·,以避免試驗誤差◕╃◕。一次加樣時間控制在5分鐘內•₪✘·,如標本數量多•₪✘·,推薦使用排槍加樣◕╃◕。
4. 請每次測定的同時做標準曲線•₪✘·,做復孔◕╃◕。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔*孔的OD值)•₪✘·,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定•₪✘·,計算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)◕╃◕。
5. 封板膜只限一次性使用•₪✘·,以避免交叉汙染◕╃◕。
6. 底物請避光儲存◕╃◕。
7. 嚴格按照說明書的操作進行•₪✘·,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品•₪✘·,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理◕╃◕。
9. 本試劑不同批號組分不得混用◕╃◕。
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